1. افزودن نمونه ها: رقت نمونه را به صفحه پوشش داده شده اضافه کنید، سرم را در PBS یا سالین در 1:20 رقیق کنید و سپس 10 ul به چاهک های واکنش میکروپلیت اضافه کنید.

2. علاوه بر کنترل: کنترل منفی 3 چاه، کنترل مثبت 1 چاهک و سرم کنترل 100 لیتر.

3. جوجه کشی: صفحه واکنش را تکان دهید تا نمونه به خوبی مخلوط شود و سپس آن را به مدت 20 دقیقه در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد یا حمام آب قرار دهید.

4. شستشوی کف: 15 میلی لیتر محلول شستشو را با آب مقطر به 300 میلی لیتر رقیق کنید. هنگام شستن با دست، محتویات هوای صفحه واکنش را باید بیرون ریخته و در سوراخ پر از مایع شستشو قرار داد و سپس در دمای 30 ایستاد تا به شدت تکان بخورد. این عمل را 5 بار تکرار کنید و خشک کنید. دستگاه باید 5 بار انجام دهد. 200 لیتر محلول شستشو را می توان به هر چاه تزریق کرد یا پر کرد، سپس به مدت 30 دقیقه رها کرد و لکه کرد.

5. محلول کاری نشاندار شده با آنزیم را اضافه کنید: 100 لیتر محلول کاری نشاندار شده با آنزیم را به هر چاهک در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد اضافه کنید و بعد از 20 دقیقه صفحه را پنج بار بشویید. صفحه شستشو مانند مرحله 4 است.

6. این مرحله آخر واکنش است، با توسعه رنگ و خاتمه واکنش: 50 لیتر از بستر به چاه واکنش اضافه می شود و رنگ به مدت 10 دقیقه در تاریکی در دمای 37 درجه سانتی گراد ایجاد می شود. محلول در هر چاه متوقف شد و مخلوط شده تا واکنش خاتمه یابد. استفاده از میکروپلیت ها باید در شرایط استریل انجام شود. پس از استفاده، صفحات را با دقت ضدعفونی و تمیز کنید، اما توجه داشته باشید که برخی از صفحات باید دستورالعمل ها را به دقت بخوانید تا ببینید آیا می توان آنها را در دمای بالا استریل کرد یا خیر.