به طور کلی، به دلیل ترکیب پیچیده خون، بسیاری از مواد، به ویژه پلاسما یا سرم حیوانات بالاتر، اثر تداخلی قوی بر واکنش بین معرف TAL (LAL) و اندوتوکسین دارند. بنابراین، وقتی اندوتوکسین چنین نمونه هایی را آزمایش می کنیم، باید قبل از آزمایش، مواد مزاحم را حذف کنیم.

در حال حاضر، مواد مزاحم در پلاسما عمدتاً شامل مهارکننده‌های مختلف پروتئاز، پروتئین‌های متصل شونده به اندوتوکسین و مهارکننده‌های پلاسمینوژن هستند. برای رنگ سنجی، فاکتور Xa می تواند زنجیره پپتیدی Boc-LEU-Gly-Arg-PNA را تجزیه کند. بنابراین لازم است این مواد مزاحم قبل از تعیین حذف شوند.

روش های پیش تصفیه برای حذف مواد مزاحم در خون به شرح زیر است:

(1) روش گرمایش رقیق: پلاسما 3 تا 10 بار با آب محلول رقیق می شود و سپس در آب 37 تا 100 درجه سانتیگراد گرم می شود. زمان نگهداری به طور کلی 5 ~ 10 دقیقه است.

(2) روش استخراج کلروفرم: همان مقدار کلروفرم را به پلاسما اضافه کنید و به مدت 3 ساعت ارتعاش کنید، سپس لایه بالایی را برای تشخیص بردارید.

(3) روش درمان اتر: اتر را برای درمان به پلاسما اضافه کنید و اتر را در دمای 40 ℃ حذف کنید.

(4) روش اسید تری فلورواستیک: برای تنظیم pH 4.0 اسید استیک را به پلاسما اضافه کنید و سپس از K2HPO4 برای تنظیم pH به 7 تا 7.5 استفاده کنید.

(5) روش تصفیه سورفکتانت: مانند روش گرمایش رقیق، فقط آب رقیق به سورفکتانت تغییر می کند.

(6) فیلتراسیون ژل؛

(7) روش درمان قلیایی: پلاسما در دمای 0.2NNaOH 37 ℃ به مدت 10 دقیقه نگه داشته شد و سپس با HCl خنثی شد.

(8) روش اسید پرکلریک (PCA) یا روش جدید اسید پرکلریک (PCA جدید).

(9) روش دانه ها: رزین مخصوص جذب کننده اندوتوکسین را داخل پلاسما قرار داده، آن را خارج کرده و معرف LAL ​​را برای واکنش اضافه کنید.

از میان این روش ها، روش های متداول مورد استفاده، روش استخراج کلروفرم، روش گرمایش رقیق، روش اسید پرکلریک (PCA) و روش جدید پرکلریک اسید (New PCA) است. دو روش اول به دلیل وجود نرخ بازیابی اندوتوکسین، مثبت کاذب و سایر مشکلات باید در طول تعیین مورد بحث قرار گیرند. روش PCA (روش جدید PCA)، به دلیل سرعت بهبود خوب اندوتوکسین اضافه شده، در حال حاضر عمدتاً در درمان پیش بالینی در ژاپن استفاده می شود.3